PCR實驗室建設是一項非常復雜的系統(tǒng)工程,，很多朋友都在網絡上試圖尋找一些詳細點的相關資料,，可是非常難找到專業(yè)和詳細的文檔，今天我們就破例分享一下如此專業(yè)和詳細的PCR實驗室建設規(guī)劃方案給大家:
       PCR實驗室的核心問題是如何避免污染,，本工程實例從ＰＣＲ實驗室環(huán)境安全角度闡述如何避免污染,。ＰＣＲ實驗室需獨立區(qū)域設置，避免與外界環(huán)境的交叉污染,，從工藝平面布局,、凈化區(qū)域劃分、人物流走向和壓力壓差控制等方面綜合闡述實驗室環(huán)境安全控制措施,。

　　PCR是聚合酶鏈式反應（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ）的簡稱,，是一種分子生物學技術，用于放大特定的ＤＮＡ片段,，可看作生物體外的特殊ＤＮＡ復制。PCR技術的問世成了生物學界的一個熱點,，特別在分子生物學和人類遺傳學等研究領域,。PCR作為一項“革命性的新技術”不僅推動分子生物學及相關學科的發(fā)展，而且為相應的產業(yè)提供一片“天空”,，在食品、醫(yī)學,、以及其他方面的應用都具有重要的作用,。由于PCR技術的高度敏感性，ＰＣＲ技術要求髙,、影響因素多,，從樣品制備到結果的產生,，任何一處細微的失誤均會造成結果的偏差,，導致樣品的假陽性和假陰性結果,。因此PCR實驗室的核心問題是如何避免污染，本文結合工程實例主要從ＰＣＲ實驗室環(huán)境安全角度闡述如何避免污染,。

　　1.執(zhí)行標準

         以下的PCR實驗室相關標準都是我們在做實驗室建設的時候必須要遵從的執(zhí)行標準,，而這些標準大家是可以免費在網絡上查詢到的，后續(xù)我們也會幫大家逐步收集整理起來,，我們也有類似的一個相關標準的集合頁面:實驗室設計規(guī)范與標準

　　《實驗室生物安全通用要求》國家標準ＧＢ１９４８９－２００８

　　《臨床基因擴增檢驗實驗室工作規(guī)范》衛(wèi)醫(yī)發(fā)［２００２］８號文

　　《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》衛(wèi)醫(yī)發(fā)［２００２］１０號文

　　《臨床基因擴增檢驗實驗室設置標準》衛(wèi)醫(yī)發(fā)［２００２］１０號文附件

　　《基因檢驗實驗室技術要求》國家質監(jiān)檢驗總局ＳＮ／Ｔ１１９３－２００３

　　《潔凈室及相關受控環(huán)境－生物污染控制》 標準ＩＳＯ１４６９８

　　《潔凈廠房設計規(guī)范》國家標準ＧＢ５００７３－２０１３

　　《潔凈室施工及驗收規(guī)范》ＧＢ５０５９１－２０１０

　　《室內空氣質量標準》國家標準ＧＢ/T1８８３－２００２

　　《生物安全實驗室建筑技術規(guī)范》國家標準ＧＢ５０３４６－２０１１

　　《病原微生物實驗室生物安全管理條例》衛(wèi)生部（２００４－１１－12）

　　2.實驗室布局

　　在PCR實驗室研究過程中，很多操作都會產生氣溶膠,，比如離心,、混勻等操作,。為保證環(huán)境安全,，ＰＣＲ實驗室設計建造需獨立區(qū)域設置，避免與其余環(huán)境的交叉混雜，下面根據工程實例從平面布局,、凈化區(qū)域劃分,，人物流設置和壓力壓差控制等方面具體介紹,。

　　2.1.平面功能劃分

　　根據PCR實驗室按工藝需求及相關規(guī)定劃分為６間，分別是１試劑準備區(qū),、２標本制備區(qū),、３擴增反應一區(qū)、４純化區(qū),、5擴增反應二區(qū),、６后純化區(qū),，布局見圖１。按國家衛(wèi)生部的要求,，各實驗區(qū)域必須是相互獨立的,，不能直通，每個獨立實驗區(qū)設有專門的閘間供工作人員換工作服和鞋,，進入各工作區(qū)域必須嚴格遵循單一方向順序,，即只能從左邊試劑準備區(qū),，標本制備區(qū)，擴增反應一區(qū),，純化區(qū),，擴增反應二區(qū)到后純化區(qū)，避免發(fā)生交叉污染,。平面布局滿足《臨床基因擴增檢驗實驗室工作規(guī)范》衛(wèi)醫(yī)發(fā)［２００２］８號文,、《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》衛(wèi)醫(yī)發(fā)［２００２］１０號文及附件《臨床基因擴增檢驗實驗室設置標準》等相關實驗室設置標準的要求。



　　2.2.凈化區(qū)域劃分

　　為避免樣本間的交叉污染,，房間采取凈化控制，總體設置為１０萬級,。閘間設置為正壓區(qū)，保證與外界環(huán)境隔離,，避免從鄰近區(qū)域進入本區(qū)域的氣溶膠污染,。詳見圖２,。

　　2.3.人流物流設置

　　人流物流設置各行其道,，避免交叉混雜，整個區(qū)域設置一個公用走廊,，工作區(qū)域之間設置試劑物品傳遞專用窗,，做到人物分流。

　　物流：在試劑準備區(qū)與標本制備區(qū),、標本制備區(qū)與ＰＣＲ擴增區(qū)之間，以及擴增區(qū)域和純化區(qū)之間設置有電子連鎖不銹鋼傳遞窗,，以單向進行試劑,、標本等物品傳送，制的試劑通過單向傳遞窗由試劑準備區(qū)傳遞到標本制備區(qū),，處理過的標本通過單向傳遞窗由標本制備區(qū)傳遞到ＰＣＲ擴增區(qū),，按照工藝流程逐次傳遞,，避免返流。單向物品傳送系統(tǒng)既保障了標本試劑不受污染,，又保障了標本試劑不污染環(huán)境,。

　　人流：人員通過閘間分別進入各自實驗區(qū)域，進出各實驗區(qū)域需要在閘間區(qū)域更換潔凈工作服,，手消毒等,。詳見圖３。

　2.4.壓力壓差設置

　　PCR實驗室應設置為負壓潔凈室,，通過壓差控制，使整個ＰＣＲ實驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的污染,，并且降低擴增產物對人員和環(huán)境的污染,。各個實驗室與非潔凈區(qū)之間的閘間保持正壓，＞１０Ｐａ,，實驗與閘間之間的氣流組織方向為：試劑準備區(qū)空氣流向閘間，標本制備區(qū)流向閘間,，而PCR擴增區(qū)氣流方向由閘間流向PCR擴增區(qū),，純化區(qū)同理；同時按照試劑單向流方向,，各個實驗室之間設置不同壓力梯度來實現(xiàn)單向氣流組織方向,，由試劑準備區(qū)、標本制備區(qū),、擴增反應一區(qū),、純化區(qū)、擴增反應二區(qū),、到后純化區(qū)壓力逐漸降低,，形成單向負壓壓力梯度依次為：＋２０Ｐａ、＋１５Ｐａ,、－５Ｐａ、－１０Ｐａ,、－２０Ｐａ,、－２５Ｐａ。詳見圖４,。